本发明公开了一种生物防霉剂及其制备方法,按一百份水的重量计,包括以下原料:抗菌蛋白或其粗品2?8份、成膜剂0.5?3份、增塑剂0.5?5份、交联剂0.5?4份;将成膜剂加水充分溶解,再加入抗菌蛋白、增塑剂及交联剂,混合均匀后,即得生物防霉液。所述抗菌蛋白粗品为B.amyloliquefaciens F1的发酵液,经超滤、硫酸铵分级沉淀所得,而抗菌蛋白为上述粗品进一步经透析、离子交换及凝胶层系等分离手段所得。本发明通过添加主要抑菌物质抗菌蛋白所得生物防霉液,抑制黄曲霉菌的生长,具有安全、高效等特点,解决了物理防腐保鲜价格昂贵、操作复杂的问题,以及化学防腐带来的药物残留的问题。本产品经济高效,使用方便,在农业及食品保鲜领域应用前景巨大。