CRISPR基因编辑技术是一项能够实现靶向性的突变目标序列、对目标基因进行敲除、敲入以及修饰的重要技术，以其操作简单、经济高效的优点超越了传统技术，成为科学界的新宠，但是，简单的基因编辑已经不能够满足现代科学研究的需要，而复杂的基因编辑需求，利用CRISPR来实现的难度仍然较大。
目前，芳景生物已经建立起完备的果蝇CRISPR基因编辑服务平台，能够提供方案设计、样品制备、显微注射、转基因筛选及分子鉴定的整体技术流程方案。且芳景生物针对多种复杂高难度的基因编辑需求，如：KO表型挽救、相似度较高同源基因替换、多位点基因突变构建、多序列和复杂序列插入、FRT序列引入实现条件敲除等，将“两步法”的技术方案进行了优化，建立了一套成本更低，效率更高的“两步法”技术方案。
1）第一步，基因敲除与attP插入（如图1）：
芳景生物提升了果蝇基因编辑的基因替换效率，可高效的将基因替换为attP-3P3-RFP-loxP序列，获得带有RFP筛选标记的KO-attP果蝇。
2）第二步，在attP果蝇中插入目的序列（如图2）：
芳景生物优化了attP序列和attB载体，将带有attB、目的序列的质粒DNA，和PhiC31表达酶质粒共注射到第一步获得果蝇的胚胎中，实现了将目的序列整合到果蝇基因组的attP位点，并通过CRE重组酶将多余序列移除，最终获得由目的序列替换原序列的最终果蝇品系。
通过该技术方案，基本可以高效的实现100kb范围内任意形式的基因编辑，解决了复杂基因编辑难度较大的问题，拓展了果蝇CRISPR基因编辑更广阔的应用场景。
另外，芳景生物致力于其他昆虫物种基因编辑平台的搭建和开发，目前，芳景正在进行或者已经完成的昆虫基因编辑的物种包括：黑水虻，玉米螟，赤拟谷盗，桔小实蝇，小菜蛾，蚊子，家蚕等。
王庆富与江苏省生产力促进中心高层次人才与外国专家服务处对接成功
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