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一种磁性纳米载体介导的不结球白菜高效遗传转化方法及其应用

成果编号:22228
价格:面议
完成单位:南京农业大学 南京市蔬菜科学研究所
单位类别:211系统院所、其他院所
完成时间:2019年
成熟程度:试生产阶段
服务产业领域: 现代农业
发布人:侯喜林 离线
为解决不结球白菜再生率低,受基因型影响大,使得转化效率低的技术问题,本发明提供一种磁性纳米载体介导的不结球白菜高效遗传转化方法,包括将含有外源基因的质粒与具有顺磁性、表面覆盖一层PEI薄膜的Fe3O4的磁性纳米载体以质量比1:1连接,得到基因—磁性纳米载体复合物;在花粉培养基中混合基因—磁性纳米载体与待转化植物花粉,在0.1~0.5T的磁场介导下进行磁转化,直接递送基因—磁性纳米载体复合物进入花粉细胞;然后通过植物授粉和受精过程实现待转化植物的外源基因遗传转化。本发明花粉培养基配方、磁性纳米粒子和质粒DNA的质量比、磁转化时间三者的组合,能够保证不结球白菜的花粉活力并有效提高磁转化效率,建立简单高效的遗传转化体系。
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成果介绍

科技计划: 省部级:江苏省重点研发计划 其他:横向课题
成果形式:新工艺
合作方式:技术转让、技术开发、技术咨询、技术服务
参与活动: 第七届中国江苏产学研合作大会
专利情况: 正在申请 ,其中:发明专利 1
已授权专利,其中:发明专利 0
成果简介
综合介绍
为解决不结球白菜再生率低,受基因型影响大,使得转化效率低的技术问题,本发明提供一种磁性纳米载体介导的不结球白菜高效遗传转化方法,包括将含有外源基因的质粒与具有顺磁性、表面覆盖一层PEI薄膜的Fe3O4的磁性纳米载体以质量比1:1连接,得到基因—磁性纳米载体复合物;在花粉培养基中混合基因—磁性纳米载体与待转化植物花粉,在0.1~0.5T的磁场介导下进行磁转化,直接递送基因—磁性纳米载体复合物进入花粉细胞;然后通过植物授粉和受精过程实现待转化植物的外源基因遗传转化。本发明花粉培养基配方、磁性纳米粒子和质粒DNA的质量比、磁转化时间三者的组合,能够保证不结球白菜的花粉活力并有效提高磁转化效率,建立简单高效的遗传转化体系。
创新要点
本发明利用一种磁性纳米载体作为介导,通过静电作用,将磁性纳米颗粒与载有外源目的基因的质粒结合,形成基因一磁性纳米颗粒复合物,置于磁板产生的强磁场之上。在磁场的介导下,将基因一磁性纳米颗粒复合物通过花粉孔传递到悬浮在花粉液体培养基的花粉中,经过人工授粉,得到转基因种子,稳定转化T0植物并将目的基因整合到植物基因组中,通过植物授粉和受精过程实现外源目的基因的遗传转化。
技术指标
见图片资料
其他说明
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