水产动物病害快速检测平台

成果编号：26183

价格：面议

完成单位：江苏海洋大学

单位类别：其他高校

完成时间：2019年

成熟程度：其他

服务产业领域：现代农业

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发布人：董志国123 离线

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在新冠疫情爆发的当口，进口水产品多次被检查出新冠病毒核酸阳性，众多水产平台都对此采取了“内采”、“价格下调”等措施，可以预见当前我国水产市场将出现持续低迷的情况。而在水产养殖病害防治方面，当前许多养殖户对此方面的知识尚未完全掌握，操作不够及时有效，为水产安全再次埋下隐患。而当前水产养殖常见传染病害检测技术尚不完善，存在检测指标少、仪器成本高、检测灵敏度低、单次检测病原体种类少、检测费用高、操作复杂、检测时间长和检测结果可读性差等问题。本成果专注于水产病害快速检测微芯片的研发与生产，其中微芯片主要基于PCR扩增、荧光探针技术,可以特异性检测造成鱼类、虾类、蟹类以及藻类病害的病原菌类型，以便养殖企业迅速根据特定病原，对症下药，减少养殖损失。本成果研制出一种病源基因检测芯片，其经过特殊处理，病原特定基因序列能够对病原物质进行定性和定量检测，检测速度极快，可在15分钟内进行定性检测，且本芯片易于携带，可通过现场采样，简单处理后直接将病样滴在芯片上，方便易用。本成果的检测原理主要是将单链寡核苷酸探针固定在膜上，以图形的形式排布在支持性芯片基片上，对DNA模板采用不对称引物浓度扩增来完成单链PCR产物的扩增，再将单链PCR产物与芯片及反应液之间进行混合反应，而后根据反应后的显色结果判断病原的类型。相较于传统芯片，本成果主要具有以下五点优势：首先是灵敏度远远高于市场上同类型的产品，其次是检测成本低，一次最多可以检测48种病原体，大大降低了检测费用；再者是相较于传统芯片20多个步骤来说，本成果操作简捷，只有3~4步，便可轻松完成；全程历经时间也摆脱了传统芯片所需要的6小时，整个杂交步骤只需10分钟，大大缩短时间成本；最后则是本成果芯片可以直接通过肉眼读取结果，不需要其他复杂仪器，设备成本显著降低。而除了上述所提到的市场环境之外，本成果产品的出现，将大大满足当前物联网水体综合实时监测市场、水体监测服务市场、水产养殖行业等多方的需求，具有广大的市场发展前景。近期，项目组基于快速检测技术平台，依次开发出南美白对虾疫病、养殖淡水鱼疫病、养殖海水鱼疫病的快速基因检测技术并推广服务。

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成果介绍

科技计划：其他：

成果形式：新技术、新工艺

合作方式：技术转让、技术开发、技术咨询

参与活动： 2020年高校院所服务苏北五市产学研合作对接活动

专利情况：未申请专利

成果简介

综合介绍

创新要点

(1) 本成果检测指标多，能够建立基于通用引物的多重扩增体系，进行单一模板多重同时扩增，是本成果的创新点。(2) 基于各病原体基因的特点，本成果建立相应探针的成熟设计方案，能够准确分别不同水产动植物病原体，是本成果的创新点。（3）在实际引物序列设计中，发现部分RNA病毒指标，型别多，序列差异较大，设计高扩增效率引物有一定难度。

技术指标

（1）同时检测常见的鱼类十种病毒性病原体；（2）设置鲤形目鱼类正常对照，用于全程质控检测过程；（3）肉眼直接可判读结果/结合自动化仪器判读；（4）扩增时间+芯片反应时间，共计约2小时左右；（5）稳定检测出拷贝数不低于100 copies/μL的十种病原体及质粒样本；（6）单管扩增，全程质控（扩增+芯片杂交）。准确性：用本项目产品检测已知病原体的阳性样本，准确率≥99[%]；特异性：检测阴性样品，结果全部为阴性；检测阳性样本，结果全部为阳性；灵敏度：稳定检测出不低于100 copies/μL的十种病原体或质粒DNA样本；重复性：不同检测条件下，能够反复多次稳定检出阳性样本及阴性样本。

其他说明

完成人信息

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